徠卡熒光顯微鏡以良好的光學性能、穩定的激發系統和人性化設計，成為生命科學、病理診斷與材料研究中觀察熒光標記樣本的核心工具。熒光成像對操作精度要求高，不當使用不僅會降低圖像質量，還可能損傷昂貴的濾光片、物鏡或光源。掌握
徠卡熒光顯微鏡正確使用方法，是獲取高質量數據、延長使用壽命的關鍵。
一、使用前準備
環境控制：在暗室或低照度環境中操作，避免雜散光干擾熒光信號；確保電源穩定，接地良好。
樣本制備合規：使用抗淬滅封片劑封固，避免氣泡；選擇與激發/發射波長匹配的熒光染料，并設置陰性對照。
檢查耗材狀態：確認汞燈或LED光源壽命未超限（汞燈通常200–300小時），濾光塊無霉斑、劃痕，物鏡無油漬或灰塵。
二、開機與光路校準
先開主機，再啟光源：尤其使用汞燈時，需預熱5–10分鐘至光強穩定；LED光源則可即開即用。
明場定位先行：先用透射光（如鹵素燈）在低倍物鏡下找到目標區域，調焦清晰，避免直接在熒光下盲目搜索導致光漂白。
正確切換熒光通道：通過轉盤或電動模塊選擇對應濾光塊，確保激發光波長、二向色鏡與發射濾光片三者匹配。切勿在無樣本時長時間開啟熒光光源。
三、成像操作要點
從低倍到高倍觀察：避免高倍物鏡（如63×油鏡）碰撞玻片；
使用低必要光強與最短曝光時間：通過軟件調節光源強度或相機增益，最大限度減少光毒性與熒光淬滅；
油鏡使用規范：僅在標有“Oil”的物鏡上滴加專用無自發熒光浸油，用后立即用鏡頭紙蘸少量二甲苯或專用清潔劑擦拭干凈。
四、關機與維護
先關熒光光源，再關主機：汞燈需冷卻后再斷電，防止熱沖擊縮短壽命；
復位光路：將物鏡轉至低倍，載物臺降至低，關閉光閘；
定期保養：每季度由專業工程師校準光路、清潔內部光路元件，檢查快門與濾光輪動作。
