生物顯微鏡微生物污染的檢測

污染的潛在來源是多方面的，如來自用具、室內空氣、工作臺面、組織樣品v溶液，以及操作過程等。因此必須盡量小心地去避免它。然而，即使是zui的實驗室，也準免不發生污染。因此。要經常進行檢測，爭取盡早發現，及時排除，防止擴大污染。

建議采用如下步驟檢測：

（1）用肉眼或生物顯微鏡檢查各步驟的污染。每2—3個月核查一次支原體（如果是原代培養，則2—3周核查一次）。

（2）如懷疑有污染，但仍不明顯，又沒有證明，除懷疑的培養物和吸管外，先將工作罩子和工作臺面清潔消毒。然后，待所有的培養工作操作步驟結束后，取懷疑培養物樣品．摘在載敢片上，在生物顯微鏡下仔細檢查，用位相差顯微鏡進行檢查。如證明有污染，將吸管丟棄，用70%酒精按沈罩子和工作臺面，30分鐘后再使用。

（3）將污染性質記錄在登記卡上。

（4）如果是新的污染，又是局部污染，沒有擴散，則將污染培養物、用來接種污染培養物的培養瓶和其他用于此培養的胰蛋白酶瓶子等丟棄到消毒劑中去，在組織培養區外的毒氣罩內操作。

（5）如果是新的污染，而且是散播的，即至少在兩個不同培養物中均發現有的，應把所有的培養液、母液以及胰蛋白酶等均丟棄。

（6）如果類似污染重復出現．則檢測母核是否污染。可采用的檢測法：1）單獨濕育或在營養肉湯中溫育；2）鋪在營養瓊脂板（Difco）上；3）假如上述兩個方法均末檢測出來，但仍有懷疑時，則取100m1，通過0.2μm濾膜過濾，然后將濾膜鋪在營養瓊脂上溫育。

（7）如果污染不但廣泛散播，又是多品種的，而且重復再現，則需要檢查消毒步驟，即烘箱和蒸氣消毒鍋的溫度、消毒時間、包裝和貯存方面是否有問題．以及房間消毒和超凈

工作臺的垂直層流的過濾器是否失效。

（8）不要企圖清除污染物的污染，除非它們是*的培養物。清除污染可以：1）用

合有比正常濃度高的抗生素的B5s清洗培養物，清洗5次；2）加抗生素到培養液中，放置48小時。如果可能，可檢測污染物對四一種抗生累比較敏感53）除去抗生素。在不加抗生素情況下培養2周，核查污染是否已被清除。

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